
南京博研生物科技有限公司推出的小鼠甲硫氨酰氨肽酶1 (METAP1) 定量检测试剂盒,以下是综合信息整理及关键要点分析:
一、核心用途
✅ 精准量化小鼠样本中 METAP1 蛋白浓度
适用于科研场景下的以下研究方向:
▪️ 疾病机制探索:如心血管/肾脏疾病、纤维化、肿瘤微环境研究中的酶活调控
▪️ 药物干预评估:检测抑制剂/激活剂对 METAP1 表达的影响
▪️ 基础生物学研究:基因敲除/转基因小鼠模型的功能验证
▪️ 临床前研究:药代动力学(PK)、毒理学(TOX)中的生物标志物监测
注:该试剂盒仅限科研使用(RUO),不可用于临床诊断。展开剩余78%二、技术特征与优势
检测方法:主流方案:双抗体夹心法(ELISA)高特异性 & 灵敏
适用样本:血清、血浆、细胞培养上清、组织裂解液(需预实验验证稀释比例)多场景兼容
检测范围:典型区间:例 0.156 - 10 ng/mL (具体详见说明书梯度)覆盖生理/病理浓度波动
灵敏度:最低检测限(LOD):≤0.1 ng/mL(取决于批次)早期微小变化的捕捉能力
精密度:板内 CV < 8%, 板间 CV < 10%确保重复实验一致性
物种特异性:专针对小鼠 METAP1 设计,避免与其他物种同源蛋白交叉反应消除跨物种干扰风险
标准化对照:配套重组小鼠 METAP1 标准品(用于绘制标准曲线)保障定量准确性
三、典型实验流程(简版)
1️⃣ 样本准备 → 离心去除颗粒物
2️⃣ 加样 → 按布局加入标准品/待测样本至包被板
3️⃣ 温育 → 37℃孵育 90 分钟(促进抗原抗体结合)
4️⃣ 洗板 → 洗涤液清洗去除未结合成分
5️⃣ 检测抗体 → 加入生物素标记的抗 METAP1 抗体
6️⃣ 放大信号 → HRP 标记亲和素复合物作用
7️⃣ 显色反应 → TMB 底物避光显色 15-20 分钟
8️⃣ 终止读数 → 硫酸终止后 450 nm 波长测定吸光度
9️⃣ 数据分析 → 根据标准曲线计算样本浓度
⏰ 耗时提示:完整流程约 3.5 小时(含两次孵育时间)四、关键质控指标
⚠️ 重点核实内容:
✔️ 特异性阻断实验数据:证明抗体仅识别目标表位
✔️ 回收率验证:向已知浓度样本添加外源性 METAP1 后的回收率(理想值>85%)
✔️ 线性范围验证:R² > 0.99的标准曲线才具可靠定量性
✔️ 基质效应测试:确认血清/血浆成分不影响检测结果
✔️ 保存条件:查看试剂盒组分(尤其是微球载体)的稳定性要求(通常需避光<-20℃)
五、常见问题解答 (FAQ)
Q1: 这个试剂盒能测大鼠或其他动物吗?
→ ❌ 不能。因抗体基于小鼠序列设计,其他物种存在氨基酸差异会导致交叉反应风险极高。若需检测大鼠,需选择对应的大鼠专用试剂盒。
Q2: 我的培养基样本非常浑浊,可以直接检测吗?
→ ⚠️ 强烈建议先离心澄清(推荐 ≥10,000×g,10 min),否则杂质会堵塞微孔板滤膜导致CV升高。必要时可用0.22μm滤头过滤。
Q3: 实验结果偏高怎么办?
→ 🔍 排查方向:
① 样本溶血释放胞内酶(METAP1部分存在于红细胞);
② 样本采集管污染(如EDTA抗凝剂可能干扰);
③ 洗板次数不足导致背景过高;
④ 显色时间过长致信号饱和。
Q4: 能否用此试剂盒测人源 METAP1?
→ 🔄 理论有交叉可能,但不建议直接使用!人鼠同源区有限,抗体亲和力未经验证,可能出现显著误差。建议优先选择人源专属试剂盒。
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